Regulação da proliferação, diferenciação e apoptose de pré-adipócitos pelo xanto-humol : trabalho de investigação

Abstract

Resumo da tese:Actualmente, a obesidade é considerada uma epidemia em todo o mundo. O tecido adiposo (TA) é um órgão endócrino especializado no armazenamento do excesso de energia na forma de triacilgliceróis e tem também a capacidade de segregar citocinas e adipocitocinas. O TA pode ser classificado de acordo com a morfologia dos adipócitos que o compõem em hiperplásico, quando tem um grande número de adipócitos, ou em hipertrófico, quando os adipócitos são de grande tamanho. As complicações metabólicas, que normalmente acompanham a obesidade, parecem estar associadas à hipertrofia dos adipócitos. O xanto-humol (XN) é um flavonóide prenilado do lúpulo (Humulus lupulus L.) que se pode encontrar na cerveja. A este composto têm sido associadas múltiplas actividades biológicas, nomeadamente quanto ao seu potencial anti-carcinogéneo. Com este estudo, pretendeu-se explorar o efeito do XN no TA, utilizando uma linha celular de pré-adipócitos de Ratinho, 3T3-L1. Para isso, testou-se o efeito do XN na proliferação, diferenciação e apoptose dos pré-adipócitos. Para avaliar a proliferação celular utilizaram-se dois métodos: quantificação das proteínas celulares com sulforrodamina B (SRB) e identificação do marcador de proliferação celular Ki67 por imuno-fluorescência. A diferenciação foi avaliada através da quantificação do conteúdo lipídico nos adipócitos e para estimar a apoptose utilizou-se o método de TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end-labeling). O XN demonstrou ter capacidade anti-proliferativa, com um IC50 de 26 (19,9-34,5) μM, 12 (9,1-16,6) μM e 17 (11,6-27,9) μM após 24, 48 e 72 h, respectivamente. Na concentração de 5 μM, o XN reduziu significativamente a expressão do Ki67 nos pré-adipócitos. (...)

Thesis abstract:Obesity is currently considered a global epidemic. Adipose tissue (AT) is an endocrine organ specialized in the storage of energy excess as triacylglycerols, also possessing the ability of secreting citokines and adipocitokines. AT may be categorized according to the characteristics of the adipocytes that compose it as hyperplastic, when there are a great number of small adipocytes, or hypertrophic when there are adipocytes of larger size. The metabolic complications which are usually associated with obesity seem to be more linked with AT adipocyte hypertrophy. Xanthohumol (XN) is a hop (Humulus lupulus L.) prenylflavonoid that may be found in beer. Several biological activities are being attributed to this compound, namely related to its anti-carcinogenic potential. In the present study, we aimed at studying the effect of XN in the AT, using a mouse preadipocyte cell line, 3T3-L1. To do so, preadipocyte proliferation, differentiation and apoptosis were measured after XN treatment. Two methods were used to assess proliferation: the quantification of whole culture protein content and the identification of the proliferation marker protein Ki67 through immunofluorescence. Differentiation was measured by assessing culture lipid content and apoptosis was determined by terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end-labeling (TUNEL). XN was able to decrease cell proliferation, displaying an IC50 of 26 (19.9-34.5) μM, 12 (9.1- 16.6) μM and 17 (11.6-27.9) μM after 24, 48 and 72 h, respectively. At 5 μM, XN significantly reduced preadipocyte Ki67 expression. (...)