Modulation of adipocyte biology by tetrahydrocannabinol : trabalho de investigação : Modulação da biologia dos adipócito pelo tetra-hidrocanabinol

Abstract

Resumo da tese:Estudos epidemiológicos revelam que a prevalência da obesidade aumentou significativamente nos últimos 20 anos e continua a aumentar alarmantemente. Está associada ao crescimento do tecido adiposo devido a hipertrofia dos adipócitos, hiperplasia ou ambos. Embora o armazenamento e libertação de lípidos sejam as funções primordiais dos adipócitos, estes são também capazes de usar moléculas lipídicas para sinalização celular. Reconhece-se actualmente que o sistema endocanabinóide desempenha um papel crucial na modulação da ingestão alimentar, bem como noutros aspectos do metabolismo energético e sabe-se também que os adipócitos expressam os dois tipos de receptores dos canabinóides (CB1 e CB2). Visto que escasseia a informação referente aos efeitos da modulação do sistema endocanabinóide nos adipócitos, o presente estudo teve como objectivo averiguar os efeitos do D9- tetra-hidrocanabinol (THC) na proliferação de pré-adipócitos e adipogénese e na lipólise de adipócitos, assim como na expressão de proteínas em préadipócitos e adipócitos. Para tal, usou-se uma linha celular de pré-adipócitos de Ratinho, as células 3T3-L1, e avaliou-se a proliferação por coloração com sulforodamina B (SRB) das proteínas da cultura e a incorporação de metiltimidina- 3H após 48 ou 72 horas de tratamento com THC (1 a 500 nM). A diferenciação foi induzida nos pré-adipócitos com um cocktail apropriado de diferenciação na presença ou ausência do canabinóide. A adipogénese foi determinada pela quantificação da acumulação lipídica após a coloração com oil red O e pela transcrição do peroxisome proliferator-activated receptor g (PPARg) por RT-PCR. O glicerol libertado para o meio de cultura nas condições basais ou após tratamento com isoproterenol (100 nM) ou insulina (100 nM) foi quantificado como um indicador da lipólise nas células. (...)

Thesis abstract:Epidemiological data show that the prevalence of obesity has significantly increased over the past 20 years and continues to do so at an alarming rate. This leads to adipose tissue (AT) growth through hypertrophy, hyperplasia, or both. While storage and release of lipids are major functions of adipocytes, the adipocyte also uses specific lipid molecules for cell intra and intercellular signaling. It is currently recognized that the endocannabinoid system (ECS) plays a crucial role in the modulation of food intake and other aspects of energy metabolism. Furthermore, adipocytes are known to express both types of cannabinoid receptors (CB1 and CB2). Given the relative scarcity of information on the effects of ECS modulation on adipocytes, in the present study we aimed to investigate the effects of D9-tetrahydrocannabinol (THC) on preadipocyte proliferation and adipogenesis, in lipolysis, as well as preadipocyte and adipocyte protein expression. Mouse 3T3-L1 preadipocytes were used to evaluate proliferation by sulforhodamine B staining of culture proteins and methyl-3H-thymidine incorporation after 48 h or 72 h of treatment with THC (1 to 500 nM). Preadipocytes were induced to differentiate with an appropriate adipogenic cocktail in the presence or absence of the cannabinoid. Adipogenesis was determined by measuring lipid accumulation after staining with oil red O and the transcription of peroxisome proliferator-activated receptor g (PPARg) through RT-PCR. Glycerol release to the culture medium under basal conditions or after isoproterenol (100 nM) or insulin (100 nM) treatments was quantified as an indicator of lipolysis in cells subjected to the same conditions. Transforming growth factor β (TGFβ), diacylglycerol lipase α (DAGLα) (...)