Detecção, identificação e quantificação de Oocistos de Cryptosporidium parvum na água : Métodos convencionais e imunofluorescência pós-separação imunomagnética

Abstract

Este trabalho reporta sobre os ensaios desenvolvidos para aplicação e validação do procedimento analítico para pesquisa de oocistos de Cryptosporidium em amostras de água e designado pela USA-Environment Protection Agency como Método 1622 . Este método compreende uma filtração adequada das amostras de água, a separação imunomagnética dos oocistos a partir do filtrado capturado e subsequente ensaio de imunofluorescência para determinação da concentração de oocistos e confirmação por coloração com 4 , 6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) e por microscopia de contraste de fase.A necessidade de definir instrumentos analíticos, eficientes e universais, para a identificação da forma infectante Cryptosporidium em amostras de água, tem sido uma constante ao longo dos últimos anos. Tal facto releva: 1) do reconhecimento de C. parvum como agente etiológico de patologia humana desde 1976, em indivíduos imunocomprometidos mas também em indivíduos imunocompetentes, tendo, em 1982, começado a aumentar o número de casos relatados, como resultado da epidemia da síndrome da imunodeficiência humana adquirida (SIDA) e 2) da constatação da existência de surtos epidémicos de criptosporidiose, incluindo o de Milwaukee em 1993, em que a água do sistema de abastecimento público foi responsável pela transmissão do parasita.Cryptosporidium é um protozoário parasita que se transmite pela ingestão de oocistos que tenham sido excretados pelas fezes de humanos ou animais infectados. A infecção pode ser transmitida pelo contacto pessoa-a-pessoa ou animal-pessoa, pela ingestão de água ou alimentos contaminados com fezes ou pelo contacto com superfícies ambientais contaminadas com fezesOs resultados obtidos sugerem uma elevada eficiência e sensibilidade do método acima referido, por comparação com os processos convencionais de filtração e identificação de protozoários em amostras de água, para avaliar o risco para a saúde pública colocado por contaminantes da água de consumo como Cryptosporidium.