Modulação da osteogénese em culturas de osso alveolar humano

Abstract

Os resultados apresentados nesta dissertação sugerem que as culturas celulares obtidas de osso alveolar humano, em condições experimentais apropriadas, podem constituir um modelo adequado para o estudo da fisiopatologia e farmacologia deste tecido ósseo e, também, de aspectos biológicos envolvidos na interacção osso alveolar/biomateriais. Os resultados obtidos evidenciam, igualmente, a importância da definição das condições experimentais, aspecto particularmente importante quando se considera a diversidade e a multiplicidade de metodologias descritas na literatura, facto que dificulta a interpretação e a comparação de resultados obtidos em estudos análogos.No capítulo III mostrou-se o comportamento morfológico e funcional de culturas celulares de osso alveolar humano efectuadas em condições experimentais definidas. As culturas primárias foram obtidas por cultura de fragmentos de osso alveolar, proveniente inicialmente de roedores e posteriormente humano, num meio de cultura apropriado (a-MEM) enriquecido com 10% de soro bovino fetal, 50 mg/mL de gentamicina e 2,5 mg/mL de anfotericina B - meio base - e na presença de substâncias que favorecem o desenvolvimento de culturas com características osteoblásticas, nomeadamente, ácido ascoórbico (AA, 50 mg/mL), b-glicerofosfato de sódio (b-GF, 10 mM) e, ainda, na ausência e na presença de dexametasona (Dex, 10 nM); as culturas foram incubadas a 37° C em atmosfera húmida contendo 95% de ar e 5% de CO2 e, as subculturas, obtidas após tripsinização das células em cultura, foram efectuadas nas mesmas condições experimentais. As culturas efectuadas nas diversas condições experimentais proliferaram gradualmente com o tempo de incubação e apresentaram uma actividade de FA elevada. Quando efectuadas apenas em meio base ou na presença de AA ou de Dex não se verificou a formação de depósitos minerais na matriz extracelular. Contudo, as culturas efectuadas na presença de uma fonte de iões fosfato (b-GF) apresentaram características ...